1. 項目背景概述

針對車間凍干機滅菌要求，使其符合2010版GMP規范，現采用氣化過氧化氫滅菌技術對潔凈艙體進行滅菌。

購置1臺博醫康（BIOCOOL）TL-V100型汽化過氧化氫滅菌器，用于車間凍干機滅菌。進行完TL-V100型汽化過氧化氫滅菌的確認后，需達到預期無菌要求。

2. 范圍

本方案適用車間凍干機滅菌的凍干機滅菌。

整個凍干機內部滅菌中使用過氧化氫氣體作為滅菌劑，對凍干機內的空氣及暴露的物體硬表面進行滅菌操作，整個過程中使用TL-V100型汽化過氧化氫發生器以及35%過氧化氫溶液，對凍干機進行相關的滅菌操作。通過針對性的滅菌過程及相應的滅菌過程參數進行滅菌，確認凍干機內部區域及物品的暴露硬質外表面過氧化氫氣體的分布均勻性并達到6個對數以上的廣譜殺滅效果，對細菌芽孢、霉菌等微生物達到較好的殺滅效果。

本方案旨在證明針對凍干機進行的過氧化氫氣體滅菌達到了預期的滅菌效果，即滅菌空間氣體分布均勻性好、達到6個對數的芽孢殺滅效率（嗜熱脂肪芽孢桿菌Geobacillus stearothermophilus，ATCC #12980）。

本設計方案遵循SFDA2010版GMP、PDA TR34等技術要求。

本設計方案僅適用于車間凍干機的滅菌。

本設計方案是根據用戶需求標準起草。

3.參考標準/指南/文件

?EPA——Material Demand Studies：Materials Sorption of Vaporized Hydrogen Peroxide

?房間內空氣及物品細菌數量調查與對策[J].中國護理雜志，2001,36（1）：50-51

?GB 22216-2008 食品添加劑 —— 過氧化氫

?滅菌技術規范 中華人民共和國衛生部

?AAMI TIR 17 附錄E

?NHSRC building Decontamination Alternatives（實用建筑物滅菌技術）

?2010年版藥典 附錄XVII 滅菌法

?YY/T0567.5-2011醫療保健產品的無菌加工——在線滅菌

?SFDA 2010版GMP

?GAMP 5

4.設備說明

4.1基本組成

?汽化過氧化氫氣體發生器（TL-V100）：1臺      外形尺寸：( L×W×H) 320mm×270mm×400mm

?數據在線打印系統：1套 （標配）

?無線平板控制系統：1套（選配）

?過氧化氫濃度檢測系統：1套（選配）

?溫濕度檢測系統：1套（標配）

?數據USB輸出模塊：1套（標配）

?過氧化氫殘留檢測器：1套（選配）

?審計追蹤：1套（標配）

4.2滅菌原理

TL-V100型汽化過氧化氫氣體發生器是將濃度為35%食品級過氧化氫溶液，通過汽化器汽化成過氧化氫蒸汽，將過氧化氫蒸汽輸送到密閉空間內進行滅菌，具體原理圖如下：

TL-V100系列工作原理圖

4.3工作過程說明

汽化過氧化氫發生器是將濃度為35%的H2O2溶液（即雙氧水），通過汽化器汽化成過氧化氫蒸汽，并通過噴頭直接噴射到密閉空間或通過管道循環對密閉艙體進行滅菌滅菌的設備。

TL-V100汽化過氧化氫發生器的工作過程分三個階段：

調節階段：將過氧化氫溶液注入汽化器汽化成過氧化氫蒸汽，并通過風機輸入到密閉空間內，直至達到預期的濃度；

滅菌階段：繼續輸入過氧化氫蒸汽，并保持預期的濃度；

排殘階段：停止輸入過氧化氫蒸汽，通過使密閉空間內的排風系統，將過氧化氫蒸汽循排出，直至密閉空間內的過氧化氫濃度降至允許的范圍內。（注：如客戶選配過氧化氫除殘模塊，可進行自動除殘，直至密閉空間內的過氧化氫濃度降至允許的范圍內）

5.產品描述

5.1 TL-V100產品描述

5.1.1 基本結構描述
（1）外觀
TL-V100型汽化過氧化氫氣體發生器整體采用304不銹鋼噴塑工藝，整體視覺良好并易于清潔。主操作面采用智能控制程序對TL-V100型汽化過氧化氫氣體發生器進行模塊化控制，.可選配無線平板遠程控制，同時在設備底部設置有萬向腳輪，背面設有拉桿便于在房間內部移動。
設備外部進出氣管路均采用標準型接口進行，進風口/出風口均采用標準型DN32快裝接口，易于拆裝、更換方便。

TL-V100汽化過氧化氫發生器整體示意圖

（2）單片機控制：

運行參數實時顯示；

階段之間自動切換；

外形尺寸：（長×寬×高）320mm×270mm×400mm

重量：20kg

5.1.3公用介質參數

電源：AC220±22V 50Hz±1Hz；

5.1.4性能特點

功率：1800W

空氣流量：大于48m3/h

注射速率：1～10g/min

汽化溫度：≤135℃

載氣過濾效率：99.9999%

滅菌劑：35%食品級過氧化氫溶液

滅菌容積：≤200m³

滅菌效力：對嗜熱脂肪芽孢桿菌的殺滅能力達到106

潔凈度：滅菌后，保證潔凈室內的無菌環境；

分布均勻性測試：通過化學指示劑進行密閉空間內部布點，確保內部VHPS良好的分布均勻性；

工作方式：連續工作

5.1.5使用環境

滅菌環境溫度：≥ 20℃

相對濕度：≤40% RH

空間密閉性良好

5.1.6安全

設備外表面溫度較高的部位設置有明顯的警示標識；

過氧化氫溶液更換處有明顯的警示說明；

控制系統能夠抵抗手持無線電設備和設備周圍1米范圍內的手機信號干擾。

6、滅菌試劑介紹

6.1滅菌劑參數：

主要成分過氧化氫35%，具有廣譜殺菌能力，對細菌、真菌、放線菌、芽孢、病毒等都有顯著效果。適用于制藥、生物技術、醫學產品生產、實驗室等等，分解后不會產生任何有害殘留，只有水和氧氣。
2H 2O2=2H2O + O2↑
通過使用空間殘留檢測儀，采用對過氧化氫敏感的檢測儀，在1小時除殘后，可驗證過氧化氫殘留量。OSHA（職業安全與健康標準）要求過氧化氫殘留小于1ppm。

6.2生物指示劑品種

嗜熱脂肪芽孢菌片(芽孢數10的6次方以上)

【產品說明】
本品符合 2020 新版《藥典》，采用 Geobacillus stearothermophils (ATCC 12980)作為指示菌，由芽孢鋼片、恢復培養基、滅菌管構成。當滅菌合格，經培養指示劑顏色保持紫色不變;不合格，則指示劑顏色由紫色變為黃色。
【使用范圍】
適用于汽化過氧化氫空間滅菌效果監測。
【使用方法】
1.在需要位置紙面朝上放置芽孢菌片袋，進行滅菌。(或從菌片袋中取出芽孢鋼片，可讓鋼片放置在平皿內，將其暴露于各個滅菌位點，進行滅菌，滅菌后立即蓋上無菌皿蓋。)
2.滅菌處理后，將菌片袋(平皿)移至超凈工作臺，在無菌條件下，用無菌鑷子從菌片袋(平皿)里取出芽孢鋼片，放入同批次配套培養基中(鑷子使用前置于酒精燈外焰處灼燒 2-3s，并遵循一次一消原則，保證鑷子無菌)。
3.將培養基瓶蓋擰緊后，插入常規恒溫培養箱內，在 55~60℃溫度間培養 24 小時。
4.陽性對照:從未經過滅菌處理的芽孢菌片袋中取出芽孢菌片放入培養基中，同時進行培養。每次培養時都必須使用陽性對照。
【結果判定】
1.培養 24 小時后觀察，培養液顏色由紫色變成黃色, 說明滅菌不全， 請重新進行滅菌。
2.若培養液顏色保持紫色不變, ，則可判斷滅菌全。
3.只有對照管生物指示劑的培養液顏色必定由紫色變成黃色呈陽性，其生物學檢測結果才算有效。

7.TL-V100汽化過氧化氫發生器對凍干機滅菌技術方案

7.1凍干機滅菌說明

艙體的滅菌采用管道循環滅菌方式。設備安放示意圖如下：

7.2 滅菌流程說明

7.2.1 準備階段
檢查設備運行環境及設備電源等各部正常；
將設備推入滅菌設備旁（ 設備上下延伸管路對接凍干機的進出口位置）
檢查發生器儲液瓶中過氧化氫溶液，佩戴護目鏡和橡膠手套等必要的防護后向儲液瓶內倒入足量的過氧化氫溶液。
連接TL-V100汽化過氧化氫發生器電源，打開電源開關 。
7.2.2 自動運行階段
7.2.2.1 調節階段
將過氧化氫溶液注入汽化器汽化成過氧化氫蒸汽，并噴射到凍干機內部，直至達到預期的濃度要求；
調節階段結束后，設備自動進入滅菌階段；
7.2.2.2 滅菌階段
自動調節加藥量，繼續向凍干機內部注入過氧化氫蒸汽，并保持預期濃度；
滅菌階段結束后，設備自動進入除殘階段；
7.2.2.3 靜置階段
加藥完畢后，靜置約1 小時，使過氧化氫滅菌氣體與空氣及物體表面充分接觸，保證滅菌效果；
7.2.2.4 排殘階段
滅菌結束后，房間的排氣系統進行排殘，直至過氧化氫濃度低于1ppm；（或選配過氧化氫除殘模塊，可進行自動除殘，直至密閉空間內的過氧化氫濃度低于1ppm）
排殘結束后移除過氧化氫發生器及相關輔助設施。

7.3 使用注意事項

使用的過氧化氫溶液為35%食品級過氧化氫溶液，否則可能會影響滅菌效果；
更換儲液瓶中的過氧化氫溶液時必須佩戴防護手套和護目鏡，避免過氧化氫溶液飛濺到皮膚和眼睛上，造成不必要的傷害；
汽化過氧化氫氣體發生器處于通電運行狀態或運行停止后不久，出風口和排氣口連接裝置及連接管路溫度較高，嚴禁觸摸。
過氧化氫發生器開啟滅菌過程中嚴禁點擊【停止】、【啟動】等按鍵，嚴格按照操作規程進行操作。

備注：實驗前準備項目

微生物學檢測方法：

1、常規檢測：
使用TL-V100汽化過氧化氫滅菌系統進行艙體滅菌不需您改變任何的常規檢測方法和步驟。通常都是使用如接觸平板法或擦拭法進行表面檢測和其它的空氣檢測方法如沉降法。
生物指示劑菌種信息：Namsa Bacillus atrophaeus(ATCC 9372)
2、使用孢子條驗證實驗（參考做法）：
使用器具：無菌平皿15個，無菌鑷子， TSB干粉培養基。
3、培養基無需配制：
3.1 設計孢子條放置位置，給無菌平皿編號。
3.2（此過程無菌操作）在開始滅菌之前把孢子條字體一面朝上放在無菌平皿內，放在需要位置，打開平皿蓋。
3.3 開始噴霧滅菌--－消毒結束。
3.4（此過程無菌操作）收集各個位置的孢子條，蓋上平皿蓋。
3.5 在實驗室工作臺內把平皿內的孢子條包裝打開用無菌鑷子夾入無菌的裝有TSB無菌培養基的管內，搖晃幾下使孢子條全浸在培養基內。
3.6 將陽性對照孢子條放入培養基內培養。
4、培養方法：
50-55攝氏度溫箱培養，24，48小時后分別觀察。
空白對照，陽性對照，和樣本觀察培養基是否變渾濁，變黃。下圖為參照圖： 芽孢條培養結果